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厭氧培養袋培養的實驗步驟

更新時間:2022-10-14      點擊次數:1448
  厭氧培養袋可在小或中空間制作厭氧環境,操作方便,無需任何復雜的專用設備,可在所有實驗室使用,非常適合實驗室中小型試驗操作。
 
  厭氧培養袋可用于培養厭氧菌,專用厭氧菌需要在嚴格的無氧氣體環境中生長,氧氣會對細菌產生毒性作用。一些厭氧菌在含有5%-10%二氧化碳的氣體環境中可以耐受低濃度氧氣。
 
  常見的專用厭氧菌有梭菌,如產氣莢膜梭菌、肉毒梭菌、破傷風梭菌、困難梭菌等,雙歧桿菌,如嬰兒雙歧桿菌、動物雙歧桿菌等,擬桿菌、梭菌、厭氧消化鏈球菌等。
 
  培養基要與厭氧環境氣體循環,如試管、錐形瓶等容器,以確保塞的透氣性;培養平板容器時,要確保平板容器具有良好的透氣性,不能用密封膜密封纏繞。
 
  實驗步驟:
 
  1、將已接種細菌的血平板以及產氣管,指示劑,催化劑放入塑料袋內,排出袋中氣體,卷疊好袋口,并用大鐵夾將塑料袋夾緊密,以防漏氣。
 
  2、折斷產氣管,管內發生反應,產生CO2和H2.CO2供細菌生長需要,能促使許多厭氧菌生長,鈀催化劑可催化H2和袋內的O2生成H2O,從而耗盡袋內的O2,待其化學作用完成后,袋內即處于無氧狀態。(由此造成厭氧環境約需半小時)
 
  3、于產氣管弄破半小時后,將裝有已還原成無色的美藍指示劑安瓿弄破,若溶液變藍色,表示美藍被氧化,袋內仍有氧氣存在,如指示劑不變藍色,即表示袋內已處于無氧狀態。
 
  4、將厭氧袋置37℃溫箱孵育,48小時后觀察結果。
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